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用水稻原生质体进行亚细胞定位时，为什么不拍摄叶绿体的自发荧光？

经测验，蛋白互作，使用水稻黄化苗制备原生质体，载体转化效率及基因表达强度较高，而黄化苗中叶绿体较少，因此水稻原生质体定位拍照时，除非与叶绿体共定位，否则不拍摄叶绿体的自发荧光。

为什么要提供GFP空载的对照图片？

（1）作为整个实验过程中的操作参照，可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。

（2）作为载体体系的参照，确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。

植物的生长发育和适应环境变化的能力，很大程度上取决于其基因表达的模式。这些基因表达模式是由多种因素调控的，其中包括被称为“启动子”的DNA序列。启动子在基因表达中起着至关重要的作用，它们能够识别和结合到DNA上，促进或抑制特定基因的转录。因此，筛选和识别具有特定功能的植物启动子是生物科学研究的重要任务之一。

启动子的筛选通常分为两个步骤：一是通过生物信息学方法在基因组中预测可能的启动子序列；二是利用实验手段对这些预测的启动子进行功能验证。

为什么有的共定位图片中叶绿体通道是玫红色？

在拟南芥、、玉米、大麦、小麦等材料中，种植培养苗子时是正常接受光照的，叶片中含有大量叶绿体，而叶绿素在640nm左右的激发光下可产生红色的自发荧光。当在这些含叶绿体较多的受体材料中做共定位实验时，共定位marker一般为红色荧光（在560nm左右的激发光下），实验及共聚焦拍摄时两个波长通道的荧光互不影响，但视野下看着比较混淆，尤其叠加后二者不易分清，因此只是在颜色显示上将叶绿体自发荧光设置为玫红色，以显示和共定位marker的区别。