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贝科新肽(多图)-蛋白互作

询盘留言|投诉|申领|删除 产品编号:587968217                    更新时间:2024-11-28
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亚细胞定位的方法荧光技术荧光技术是一种常用的亚细胞定位方法,它利用标记目标蛋白质,然后使用荧光显微镜观察其位置。这种方法具有高特异性、高灵敏度和高分辨率等优点,但也可能存在交叉反应等干扰因素。绿色荧光蛋白标记绿色荧光蛋白标记是一种非侵入性的亚细胞定位方法,它可以将目标蛋白质与绿色荧光蛋白融合,从而使其在荧光显微镜下可见。这种方法具有较好的特异性和灵敏度,但需要将目标蛋白质进行基因改造,可能影响其天然状态。

为什么有的共定位图片中叶绿体通道是玫红色?

在拟南芥、、玉米、大麦、小麦等材料中,种植培养苗子时是正常接受光照的,叶片中含有大量叶绿体,而叶绿素在640nm左右的激发光下可产生红色的自发荧光。当在这些含叶绿体较多的受体材料中做共定位实验时,共定位marker一般为红色荧光(在560nm左右的激发光下),蛋白互作,实验及共聚焦拍摄时两个波长通道的荧光互不影响,但视野下看着比较混淆,尤其叠加后二者不易分清,因此只是在颜色显示上将叶绿体自发荧光设置为玫红色,以显示和共定位marker的区别。

除了洋葱亚细胞定位,还有许多其他亚细胞定位方法。其中,比较常见的有:

荧光法:将学方法与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进行细胞定位。用荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等也称为荧光细胞(或组织)化学技术。

GFP融合蛋白表达法:将目的蛋白与绿色荧光蛋白(GFP)融合,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达位置。

亚细胞结构分离定位法。

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