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所在地区: | 湖北 武汉 |
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主要方法
免疫荧光技术:利用抗原与的特异性结合原理,双分子荧光互补,将荧光标记的与细胞内的目标蛋白结合,然后通过荧光显微镜观察荧光信号的位置,从而确定目标蛋白的亚细胞定位。
绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白技术:将绿色荧光蛋白基因与目标蛋白基因融合,构建成融合蛋白表达载体。当该载体在细胞中表达时,产生的融合蛋白会带有绿色荧光,可直接通过荧光显微镜观察其在细胞内的分布,进而确定目标蛋白的亚细胞定位。
洋葱亚细胞定位 如何定位重要细胞器 亚细胞定位办法就是用来肯定细胞内分子在细胞中的位置的一种办法。如何使用荧光显微镜技术来定位洋葱细胞中的一些重要细胞器。
植物细胞是由许多不同的细胞器组成的,这些细胞器在细胞内扮演着不同的角色。为了研究这些细胞器的功能和位置,科学家们使用各种技术来对它们进行定位。其中一种常用的技术是荧光显微镜技术,它可以通过标记特定的蛋白质或化合物来观察它们在细胞内的位置。
为什么有的共定位图片中叶绿体通道是玫红色?
在拟南芥、、玉米、大麦、小麦等材料中,种植培养苗子时是正常接受光照的,叶片中含有大量叶绿体,而叶绿素在640nm左右的激发光下可产生红色的自发荧光。当在这些含叶绿体较多的受体材料中做共定位实验时,共定位marker一般为红色荧光(在560nm左右的激发光下),实验及共聚焦拍摄时两个波长通道的荧光互不影响,但视野下看着比较混淆,尤其叠加后二者不易分清,因此只是在颜色显示上将叶绿体自发荧光设置为玫红色,以显示和共定位marker的区别。
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