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为什么要提供GFP空载的对照图片?
(1)作为整个实验过程中的操作参照,可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。
(2)作为载体体系的参照,确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。
拍摄时为什么有明场通道?
(1)显示细胞状态,有活力的细胞应该有正确且明显的细胞形态,变形或破碎的细胞说明此时细胞不是适状态或细胞已。
(2)显示荧光确实是细胞内蛋白表达的,植物蛋白互作,而不是细胞碎片及杂质产生的杂光。
除了洋葱亚细胞定位,还有许多其他亚细胞定位方法。其中,比较常见的有:
荧光法:将学方法与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进行细胞定位。用荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等也称为荧光细胞(或组织)化学技术。
GFP融合蛋白表达法:将目的蛋白与绿色荧光蛋白(GFP)融合,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达位置。
亚细胞结构分离定位法。
植物细胞中的另一个重要组成部分是液泡。液泡是充满液体的囊泡,它们在细胞的中央位置,并且包含着大量的水分和离子。液泡对于细胞的形态、生长和发育都起着重要的作用,同时也在细胞内起着重要的储存作用。
植物细胞的另一个特点是它们具有叶绿体。叶绿体是进行光合作用的地方,它们含有绿色的叶绿素,可以帮助植物吸收太阳光能,并将其转化为化学能,为植物的生长和发育提供能量。
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