贝科新肽-蛋白互作

双分子荧光互补技术的实验步骤设计和合成带有荧光标记的分子探针。这些分子探针可以是蛋白质、多肽、小分子化合物等，带有荧光标记的分子探针可以用来检测目标分子的存在和相互作用情况。将带有荧光标记的分子探针与目标分子混合，并保持适宜的反应条件。通过荧光光谱仪等设备检测两个荧光基团之间的能量转移效率。通过比较实验组和对照组的数据，可以推断出两个分子之间的相互作用情况。

黄金纳米棒在癌细胞中的亚细胞定位：Sana Mesiya 等人研究了黄金纳米棒在癌细胞中的亚细胞定位。结果表明，蛋白互作，黄金纳米棒定位于癌细胞的线粒体和溶酶体中，这一发现可能有助于开发基于纳米技术的激光免疫疗法。

槟榔 Catalase 基因的亚细胞定位：梁婷等人通过同源和 RACE 技术获得槟榔全长 cDNA，并对其进行生物信息学分析及亚细胞定位。结果表明，槟榔 Catalase 基因编码的蛋白质可能定位于特定的细胞器中。

亚细胞定位操作步骤

1、通过一些在线网站预测亚细胞定位

2、亚细胞定位载体构建

（1）引物设计：利用引物设计软件，根据pEGP-MCS-N1或pEGP-C1-MCS的酶切位点设计目的基因引物。

（2）载体构建：将PCR产物酶切后插入pEGP-MCS-N1或pEF-C1-MCS，得到表达目的基因与EGP融合蛋白质的真核表达载体。

3、细胞转染

当细胞生长到对数生长期时，接种到共聚焦显微镜的玻璃底培养皿（35mm petri dish，10 mm Microwell）中，培养过夜。当细胞贴壁率达到30%~50%时，将融合绿色荧光蛋白GFP的重组载体质粒和目标细胞器质粒共转染细胞。37℃孵箱培养24~72h。

4、激光扫描共聚焦显微镜观察

将上述细胞分别在24、36、48、72h的时间点，根据实验需求选择对应激发波长（常用405nm、488nm和561nm），使用共聚焦显微镜观察，采取图像。

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