湖北蛋白互作-武汉贝科新肽(图)

细胞膜及内膜系统相关的协同作用

黏着斑激酶（FAK）定位于细胞质黏着斑、细胞核和内体中。在细胞质黏着斑中，FAK 通过调控细胞黏着斑的解聚与组装及多个蛋白质的磷酸化从而调节细胞的增殖和迁移。在内体中，FAK 通过 FERM 结构域定位到内体并被。内体中整合素的信号转导时间比质膜上持续的时间更长，并且能够阻止肿1瘤细胞发生失巢凋亡，因此，内体 FAK 可通过抵抗失巢凋亡促进肿1瘤细胞的转移。而在细胞核中，FAK 可导致 p53 的多聚泛素化及降解，从而影响正常细胞的存活和肿1瘤细胞的生长。此外，核 FAK 还能够通过调节细胞的因子和趋化因子的表达促进肿1瘤免疫逃逸的发生。这表明 FAK 在不同亚细胞定位下，与不同的蛋白质协同作用，共同调控肿1瘤的发生和发展。

植物生物学的研究已经取得了显著的进步，但我们对植物启动子的了解仍然有限。尽管我们已经识别了一些重要的植物启动子，但我们仍然需要更深入的研究来理解它们如何识别和结合到DNA上，以及它们如何调控植物的生长发育和适应环境变化。未来的研究可能会集中在开发更有效的筛选方法和建立更的启动子数据库，以帮助我们更好地理解植物的基因表达调控机制。

植物启动子的筛选和研究是一项重要的研究任务，它不仅可以帮助我们更好地理解植物的生长发育和适应环境变化的能力，也可以为植物遗传育种和生物工程提供新的工具和策略。随着科技的不断进步和研究方法的不断完善，我们对植物启动子的理解将越来越深入，对植物生物学的理解也将越来越。

亚细胞定位操作步骤

1、通过一些在线网站预测亚细胞定位

2、亚细胞定位载体构建

（1）引物设计：利用引物设计软件，根据pEGP-MCS-N1或pEGP-C1-MCS的酶切位点设计目的基因引物。

（2）载体构建：将PCR产物酶切后插入pEGP-MCS-N1或pEF-C1-MCS，得到表达目的基因与EGP融合蛋白质的真核表达载体。

3、细胞转染

当细胞生长到对数生长期时，接种到共聚焦显微镜的玻璃底培养皿（35mm petri dish，10 mm Microwell）中，培养过夜。当细胞贴壁率达到30%~50%时，将融合绿色荧光蛋白GFP的重组载体质粒和目标细胞器质粒共转染细胞。37℃孵箱培养24~72h。

4、激光扫描共聚焦显微镜观察

将上述细胞分别在24、36、48、72h的时间点，蛋白互作，根据实验需求选择对应激发波长（常用405nm、488nm和561nm），使用共聚焦显微镜观察，采取图像。