蛋白互作-贝科新肽科技公司

构建亚细胞定位载体时，GFP融合位置为什么有N端、C端之分？

若序列中存在信号肽，则构建载体时需避开这一端来融合荧光蛋白。需注意不同的融合方式可能会得到不同的定位结果，例如融合在荧光蛋白N端的目标蛋白一般无法得到过氧化物酶体的定位结果；融合在荧光蛋白C端的目标蛋白一般无法得到线粒体、质体的定位结果。

为什么不同的受体材料有时得到的定位结果不一样？

不同物种的细胞在翻译表达基因时，蛋白互作，其表达模式和影响因子不同。受物种差异的影响，同一个载体在不同的受体材料中表达的位置可能不同，因此建议实验时尽可能选用与目的基因来源相近的受体材料进行表达。

洋葱亚细胞定位 如何定位重要细胞器 亚细胞定位办法就是用来肯定细胞内分子在细胞中的位置的一种办法。如何使用荧光显微镜技术来定位洋葱细胞中的一些重要细胞器。

植物细胞是由许多不同的细胞器组成的，这些细胞器在细胞内扮演着不同的角色。为了研究这些细胞器的功能和位置，科学家们使用各种技术来对它们进行定位。其中一种常用的技术是荧光显微镜技术，它可以通过标记特定的蛋白质或化合物来观察它们在细胞内的位置。

基因法转化洋葱表皮细胞：

分别用70%乙醇和灭菌蒸馏水清洗金粉（直径为1 μm），加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液，取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋葱表皮的玻璃皿中，边振荡边加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP质粒，逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亚精胺和100 μL2.5 mol·L-1 CaCl2，振荡混匀。基因GDS-80轰击时氦气罐的气压为1 300 psi，取10 μL DNA 包裹好的微粒悬浮液加到基因中央，进行轰击，之后放置25℃避光过夜培养，使用ConfocalLaser激光共聚焦显微镜观察。