洋葱亚细胞定位-亚细胞定位-贝科新肽(查看)

双分子荧光互补（Bimolecular Fluorescence Complementation，洋葱亚细胞定位，BiFC）是一种用于研究蛋白质-蛋白质相互作用的强大技术。它利用荧光蛋白的特性，将两个不同的荧光蛋白片段（通常是黄色荧光蛋白和绿色荧光蛋白）分别与两个不同的蛋白质结合，以检测它们之间的相互作用。

BiFC的原理是基于荧光蛋白的特性，这些荧光蛋白可以发射出特定的光子，从而在细胞中产生荧光信号。当两个不同的荧光蛋白片段结合在一起时，它们会形成一个完整的荧光蛋白，并发出更强的荧光信号。因此，亚细胞定位方法，通过观察荧光信号的强度和分布，我们可以推断出两个蛋白质是否相互作用以及相互作用的确切位置。

不同亚细胞定位的蛋白质在细胞生理过程中的具体协同作用有哪些？

蛋白质在细胞内的不同亚细胞定位对细胞生理过程起着至关重要的作用。不同定位的蛋白质之间往往存在协同作用，共同维持细胞的正常生理功能。以下将详细阐述不同亚细胞定位的蛋白质在细胞生理过程中的具体协同作用。

一、核质间的协同作用

BRCA1 基因编码的蛋白质 BRCA1 是一种抑制蛋白，具有多个蛋白质相互作用结构域，在调节 DNA 修复和维护、细胞周期进程、转录以及细胞存活 / 凋亡等方面发挥重要作用11。BRCA1 含有核输出和核定位信号等不同的运输序列，能够在细胞核与细胞质特定位点之间穿梭，包括 DNA 修复焦点、中心体和线粒体等。BRCA1 的核运输和泛素 E3 连接酶酶活性受到其二聚体结合伙伴 BARD1 的严格调控，并进一步受到突变和多种信号通路的调节。这表明 BRCA1 在细胞核与细胞质之间的穿梭及其与不同蛋白质的相互作用，在细胞生理过程中发挥着重要的协同作用。例如，亚细胞定位，在 DNA 修复过程中，细胞核中的 BRCA1 可能与细胞质中的某些蛋白质协同作用，共同确保 DNA 修复的准确性和性。

为什么不先对基因做预测，在预测的结果上直接做共定位？

不同的预测网站有不同的计算方法，同一个基因在不同的预测网站也可能得出不同的定位结果。另外所有的结果都应是基于实验得到的，对于不清楚可能定位在哪里的基因，一般推荐先做普通定位，根据普通定位的结果再决定做哪种细胞器的共定位。

适用于什么实验场景？

（1）基因功能研究，文章里总少不了这一项。

（2）研究蛋白相互作用，与酵母双杂实验结果相互验证。