荧光原位杂交-贝科新肽科技公司(在线咨询)

原位杂交技术自 1969 年由 Pardue 和 Gall 建立以来，不断优化：

从性标记发展为荧光标记（FISH），实现了多重标记和高分辨率成像；结合共聚焦显微镜、超高分辨率显微镜，进一步提升了信号检测的精度；与测序技术结合（如原位测序），可在原位获取高通量核酸序列信息，为空间转录组学等领域提供了强大工具。

原位杂交技术凭借 “空间定位” 的优势，在分子生物学、医学诊断和生命科学研究中占据重要地位，是连接分子水平与形态学水平的关键桥梁。

荧光原位杂交技术（Fluorescence In Situ

Hybridization，FISH）利用核酸分子单链之间互补的碱基序列，通过标记的核酸探针与目标DNA或RNA进行杂交，进而定位和检测特定DNA序列的技术。探针标记可以采用荧光、或者生物素。FISH技术的基本原理是使用已知的标记单链核酸作为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行杂交，形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴呈线性排列，因此可以通过探针直接与染色体进行杂交，从而将特定的基因在染色体上定位。与传统的性标记原位杂交相比，FISH技术具有快速、检测信号强、杂交特异性高和可以多重染色等特点。该方法适用于植物染色体检测、土壤（泥巴）中细菌检测。

探针杂交将标记的探针溶液滴加于样本，在适宜温度（如 37-65℃）下孵育数小时至过夜，荧光原位杂交，使探针与目标 RNA 特异性结合。洗涤用不同浓度的盐溶液洗涤样本，去除未结合的游离探针，降低背景信号。信号检测若为荧光探针：直接用荧光显微镜观察荧光信号；若为生物素 / 探针：通过亲和素 - 生物素复合物或结合标记物，再用酶（如辣根过氧化物酶）催化显色剂（如 DAB）产生可见信号。结果分析观察信号的位置（如细胞内、组织区域）、强度和分布，结合形态学特征解读结果。

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