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染色体荧光原位杂交-贝科新肽科技公司-原位杂交

询盘留言|投诉|申领|删除 产品编号:604073159                    更新时间:2025-11-08
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原位杂交技术可以应用于以下场景:

组织中病毒DNA/RNA的检测和定位。例如,染色体原位杂交,可以用于检测EB病毒mRNA、人类状瘤病毒和巨细胞病毒DNA等。

癌基因、抑癌基因及其他各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测。

检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等。

在植物基因组研究中的应用。例如,通过与特定基因序列的探针进行杂交,可以在植物染色体上定位到目标基因的位置,进而构建遗传图谱,为植物育种和基因组研究提供基础数据。

FISH是原位杂交技术大家族中的一员,因其所用探针被荧光物质标记(间接或直接)而得名,原位杂交,该方法在80年代末 被发明,现已从实验室逐步进入临床诊断领域。基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火 温度下复性;通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象(即维持其原位)的前提下对靶核酸进行分析。DNA荧光标记探针是其中常用的一类核酸探针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的DNA进行染色体及基因水平 的分析。荧光标记探针不对环境构成污染,灵敏度能得到保障,可进行多色观察分析,因而可同时使用多个探针,缩 短因单个探针分开使用导致的周期过程和技术障碍。

组织原位杂交(Tissue in situ hybridization),即原位杂交组织化学技术和原位杂交细胞化学技术

原位杂交技术的基本原理

利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,形成杂交的双链。

1.两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,原位杂交检测,通过氢键结合,染色体荧光原位杂交,形成DNA-DNA、DNA一RNA或RNA一RNA双键分子

2.应用带有标记的(有性同位素,如3H、35S、32P,荧光素、生物素、等非性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交

3.用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在与定位

用原位杂交术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。

此方法有很高的敏感性和特异性,可进一步从分子水来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。

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