






外泌体的研究离不开的表征技术,其中形态学鉴定是外泌体研究的基础前提。由于外泌体尺寸微小(远低于光学显微镜的分辨率极限),传统光学显微镜无法清晰呈现其形态和结构,而电子显微镜技术凭借电子束的短波长特性,分辨率可达到纳米级别,能够直观、清晰地展示外泌体的超微结构,成为外泌体形态学鉴定的“金标准”。目前,用于外泌体研究的电镜技术主要包括透射电子显微镜(Transmission Electron Microscopy, TEM)、扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscopy, SEM)、冷冻透射电子显微镜(Cryo-Transmission Electron Microscopy, Cryo-TEM)、电子断层扫描(Electron Tomography,外泌体检测技术, ET)及免疫电镜等,各类技术各具特色,分别适用于不同的研究需求,共同推动了外泌体研究的深入发展。

冷冻透射电子显微镜是在传统TEM的基础上发展而来的一种新型电镜技术,其优势是能够在接近外泌体天然状态的条件下,呈现其超微结构,避免了传统TEM中固定、脱水、染色等处理过程对於外泌体形态和结构的破坏。其原理是将外泌体样品快速冷冻至液氮温度(-196℃),使样品中的水分迅速玻璃化(形成无定形冰),避免水分结晶对於外泌体结构的破坏;然后将冷冻后的样品放入Cryo-TEM样品室(维持液氮温度),利用电子束穿透样品,形成外泌体的超微结构图像,分辨率可达到0.1~0.2 nm,能够清晰呈现外泌体的天然形态、脂质双层膜、内部成分及空间结构。
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