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武汉贝科新肽科技有限公司

主营: 原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选

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外泌体提取-武汉贝科新肽科技公司(图)

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  • 主营业务:原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选
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外泌体作为细胞分泌的纳米级脂质双层膜囊泡,广泛参与细胞间通讯、物质运输及信号传递,在生理病理过程中发挥关键作用,其形态学特征、结构完整性及功能关联性的研究已成为生命科学、医学诊断及研发领域的热点方向。电子显微镜(简称电镜)技术凭借其纳米级的超高分辨率,能够直观呈现外泌体的大小、形态、膜结构及内部成分,是外泌体鉴定、表征及机制研究的工具。


粒径与浓度分析的主流技术为纳米颗粒分析(NTA),外泌体提取,其基于光散射原理,通过高速摄像机记录外泌体的布朗运动轨迹,结合斯托克斯-爱因斯坦方程,可快速获得外泌体的粒径分布与浓度信息,检测过程无需复杂样本处理,能在近乎原始状态下检测外泌体,但对浓度过高或过低的样本准确性受影响,且无法区分外泌体与其他相似粒径的杂质颗粒。


主流电镜技术与流程

传统透射电镜(负染 TEM,常用)

样品制备:纯化外泌体悬液(离心 + 0.22 μm 过滤),滴至 Formvar / 碳膜铜网吸附(5–30 min);2% 预固定,再用 1–2% 醋酸铀(UA)或 2% 磷钨酸(PTA,pH 6.5–7.0)负染(0.5–2 min),吸干后室温干燥。

成像参数:加速电压 80–120 kV,放大倍数 50,000–100,000×,低剂量模式避免样品损伤。

典型图像:双层膜清晰,呈亮边暗背景的杯状 / 圆形,直径符合 30–150 nm 范围;盐结晶为规则几何形、细胞碎片不规则,需排除。




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