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植物的生长发育和适应环境变化的能力,很大程度上取决于其基因表达的模式。这些基因表达模式是由多种因素调控的,其中包括被称为“启动子”的DNA序列。启动子在基因表达中起着至关重要的作用,它们能够识别和结合到DNA上,促进或抑制特定基因的转录。因此,筛选和识别具有特定功能的植物启动子是生物科学研究的重要任务之一。
启动子的筛选通常分为两个步骤:一是通过生物信息学方法在基因组中预测可能的启动子序列;二是利用实验手段对这些预测的启动子进行功能验证。
为什么有的基因定位结果与预想的不一致?
对于一个特定的定位载体,只要荧光表达较好,其定位结果是确定的,不会随人为意愿或操作而改变。至于有时候和预想的结果不一样,可能和蛋白本身、选择的表达载体以及荧光蛋白融合方式等有关。
为什么有的普通定位结果出来后无法准确判断其定位位置?
细胞中的细胞器复杂且多样,除一些常见的、特征比较明显的细胞器外,有些细胞器在激光共聚焦下形状比较相似,例如:线粒体、过氧化物酶体、高尔基体等细胞器,它们的荧光表达形状可能都是点状,因此不易区分。这时可以结合基因的其他功能研究来判断其可能表达的位置。另外,蛋白表达本身也是一个复杂的过程,涉及到多个合成场所及转运过程,自身表达情况可能比较复杂,因此不易判断具体的表达位置。
细胞膜及内膜系统相关的协同作用
黏着斑激酶(FAK)定位于细胞质黏着斑、细胞核和内体中。在细胞质黏着斑中,FAK 通过调控细胞黏着斑的解聚与组装及多个蛋白质的磷酸化从而调节细胞的增殖和迁移。在内体中,FAK 通过 FERM 结构域定位到内体并被。内体中整合素的信号转导时间比质膜上持续的时间更长,并且能够阻止肿1瘤细胞发生失巢凋亡,因此,内体 FAK 可通过抵抗失巢凋亡促进肿1瘤细胞的转移。而在细胞核中,FAK 可导致 p53 的多聚泛素化及降解,从而影响正常细胞的存活和肿1瘤细胞的生长。此外,蛋白互作,核 FAK 还能够通过调节细胞的因子和趋化因子的表达促进肿1瘤免疫逃逸的发生。这表明 FAK 在不同亚细胞定位下,与不同的蛋白质协同作用,共同调控肿1瘤的发生和发展。
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