湖北免疫蛋白荧光定位-贝科新肽(推荐商家)

构建亚细胞定位载体时，免疫蛋白荧光定位，GFP融合位置为什么有N端、C端之分？

若序列中存在信号肽，则构建载体时需避开这一端来融合荧光蛋白。需注意不同的融合方式可能会得到不同的定位结果，例如融合在荧光蛋白N端的目标蛋白一般无法得到过氧化物酶体的定位结果；融合在荧光蛋白C端的目标蛋白一般无法得到线粒体、质体的定位结果。

为什么不同的受体材料有时得到的定位结果不一样？

不同物种的细胞在翻译表达基因时，其表达模式和影响因子不同。受物种差异的影响，同一个载体在不同的受体材料中表达的位置可能不同，因此建议实验时尽可能选用与目的基因来源相近的受体材料进行表达。

相关数据库

SUBA：主要聚焦于植物蛋白质的亚细胞定位信息，为研究植物细胞内蛋白质的分布和功能提供了丰富的数据资源。

Cell-PLoc：提供了多种生物蛋白质亚细胞定位的预测和注释信息，涵盖了细菌、真菌、动物和植物等多个物种。

Human Protein Atlas：专注于人类蛋白质的亚细胞定位数据，通过多种实验技术和方法，系统地对人类蛋白质在细胞内的位置进行了标注和展示。

用水稻原生质体进行亚细胞定位时，为什么不拍摄叶绿体的自发荧光？

经测验，使用水稻黄化苗制备原生质体，载体转化效率及基因表达强度较高，而黄化苗中叶绿体较少，因此水稻原生质体定位拍照时，除非与叶绿体共定位，否则不拍摄叶绿体的自发荧光。

为什么要提供GFP空载的对照图片？

（1）作为整个实验过程中的操作参照，可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。

（2）作为载体体系的参照，确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。