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武汉贝科新肽科技有限公司

主营: 原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选

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GISH-贝科新肽(在线咨询)

询盘留言|投诉|申领|删除 产品编号:596824887                    更新时间:2025-05-06
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  • 主营业务:原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选
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透射电子显微镜透射电子显微镜是一种高分辨率的亚细胞定位方法,它可以通过观察细胞超微结构来确定目标蛋白质的位置。这种方法需要制备样品,但可以提供更直观的细胞结构信息。原子力显微镜原子力显微镜是一种可以在纳米水平上观察细胞表面的亚细胞结构的技术。它可以通过检测样品表面的原子相互作用来形成高分辨率的图像。这种方法不需制备样品,可在自然状态下观察细胞表面结构。

主要方法

免疫荧光技术:利用抗原与的特异性结合原理,将荧光标记的与细胞内的目标蛋白结合,GISH,然后通过荧光显微镜观察荧光信号的位置,从而确定目标蛋白的亚细胞定位。

绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白技术:将绿色荧光蛋白基因与目标蛋白基因融合,构建成融合蛋白表达载体。当该载体在细胞中表达时,产生的融合蛋白会带有绿色荧光,可直接通过荧光显微镜观察其在细胞内的分布,进而确定目标蛋白的亚细胞定位。

亚细胞定位原理

利用GFP、RFP等荧光蛋白具有的荧光性质和灵敏性,来示踪细胞内的蛋白。将目标蛋白与荧光蛋白的N端或者C端融合,通过瞬转或稳转,使该融合蛋白在受体材料细胞内表达,目标蛋白会牵引荧光蛋白一起定位到目标细胞器,经过激光共聚焦显微镜激光照射,荧光蛋白会发出荧光,通过观察荧光蛋白在细胞内显示的位置,从而可以确定目标蛋白的亚细胞定位情况,即可对蛋白质进行准确定位。

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