植物蛋白互作-武汉贝科新肽(图)

亚细胞定位即指某种生物大分子物质或脂类在细胞内存在的具体位置。蛋白质在细胞质中经过翻译并合成，由蛋白质分选信号引导而被转运到特定的亚细胞结构中以参与细胞的各种生命活动，这一过程称为蛋白质亚细胞定位。蛋白质的功能、代谢以及相互作用等都与其亚细胞定位密切相关，成熟蛋白质必须在特定的亚细胞结构中才能发挥正确稳定的生物学功能，如果定位发生偏差，将对细胞功能甚至生命产生重大影响，植物蛋白互作，因此对蛋白质亚细胞定位的研究具有重要意义。

洋葱亚细胞定位的步骤一般包括以下内容：取材：选取适当的新鲜洋葱材料。

固定：使用适当的固定剂对洋葱材料进行固定，以便进行后续的实验操作。

切片：将固定好的洋葱材料切成薄片，以便观察。

荧光染料标记：选取适当的荧光染料，对洋葱细胞的亚细胞结构进行标记。例如，可以用荧光染料标记叶绿体或线粒体等细胞器。

观察：使用荧光显微镜观察标记的洋葱细胞的亚细胞结构，观察各细胞器的位置和分布情况。

分析：通过图像处理软件对观察到的亚细胞结构进行定性和定量分析，例如计算各细胞器的面积、周长、形状因子等参数。

总结：根据实验观察和分析结果，得出结论，总结出洋葱细胞的亚细胞结构分布和特点。

亚细胞定位原理

利用GFP、RFP等荧光蛋白具有的荧光性质和灵敏性，来示踪细胞内的蛋白。将目标蛋白与荧光蛋白的N端或者C端融合，通过瞬转或稳转，使该融合蛋白在受体材料细胞内表达，目标蛋白会牵引荧光蛋白一起定位到目标细胞器，经过激光共聚焦显微镜激光照射，荧光蛋白会发出荧光，通过观察荧光蛋白在细胞内显示的位置，从而可以确定目标蛋白的亚细胞定位情况，即可对蛋白质进行准确定位。