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武汉贝科新肽科技有限公司

主营: 原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选

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武汉贝科新肽科技有限公司
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荧光定量-武汉贝科新肽公司

询盘留言|投诉|申领|删除 产品编号:599891458                    更新时间:2025-07-15
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为什么要提供GFP空载的对照图片?

(1)作为整个实验过程中的操作参照,可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。

(2)作为载体体系的参照,确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。

拍摄时为什么有明场通道?

(1)显示细胞状态,有活力的细胞应该有正确且明显的细胞形态,荧光定量,变形或破碎的细胞说明此时细胞不是适状态或细胞已。

(2)显示荧光确实是细胞内蛋白表达的,而不是细胞碎片及杂质产生的杂光。

主要方法

免疫荧光技术:利用抗原与的特异性结合原理,将荧光标记的与细胞内的目标蛋白结合,然后通过荧光显微镜观察荧光信号的位置,从而确定目标蛋白的亚细胞定位。

绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白技术:将绿色荧光蛋白基因与目标蛋白基因融合,构建成融合蛋白表达载体。当该载体在细胞中表达时,产生的融合蛋白会带有绿色荧光,可直接通过荧光显微镜观察其在细胞内的分布,进而确定目标蛋白的亚细胞定位。

基因法转化洋葱表皮细胞:

分别用70%乙醇和灭菌蒸馏水清洗金粉(直径为1 μm),加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液,取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋葱表皮的玻璃皿中,边振荡边加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP质粒,逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亚精胺和100 μL2.5 mol·L-1 CaCl2,振荡混匀。基因GDS-80轰击时氦气罐的气压为1 300 psi,取10 μL DNA 包裹好的微粒悬浮液加到基因中央,进行轰击,之后放置25℃避光过夜培养,使用ConfocalLaser激光共聚焦显微镜观察。

荧光定量-武汉贝科新肽公司由武汉贝科新肽科技有限公司提供。“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”选择武汉贝科新肽科技有限公司,公司位于:湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号,多年来,贝科新肽坚持为客户提供好的服务,联系人:夏先生。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。贝科新肽期待成为您的长期合作伙伴!
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