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原位杂交杂交液
(一)杂交液内除含一定浓度的标记探针外,还含有较高浓度的盐类、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛白蛋白及载体DNA或RNA等。
(二)杂交液中含有较高浓度的Na+可使杂交率增加,可以减低探针与组织标本之间的静电结合。
(三)贾酰胺可使杂交温度降低,染色体原位杂交,所以杂交液中加入适量的甲酰胺,原位杂交,可避免因杂交温度过高而引起的组织形态结构的破坏以及标本的脱落。
(四)硫酸葡聚糖能与水结合,从而减少杂交液的有效容积,提高探针有效浓度,以达到提高杂交率的目的。

原位杂交技术(in situhybridization)是以标记的核酸分子为探针,荧光原位杂交,在组织细胞原位检测特异核酸分子的技术。使含有特异序列、经过标记的核酸单链即探针,在适宜条件下与组织细胞中的互补核酸单链即靶核酸发生杂交,再以自显影或细胞化学方法对标记探针进行探测,从而在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子。
可以检测cRNA、miRNA、LnRNA、DNA。可以各种种属的标本,包括哺乳动物、爬行动物、菌、植物标本。也可以检测组织芯片。

植物原位杂交的应用包括:
研究基因表达:通过观察荧光信号的位置和数量,可以确定目标基因在植物组织中的表达模式和位置。
染色体定位:将目标基因与染色体中的特定位置进行比较,可以确定目标基因在染色体中的位置和分布。
基因:通过原位杂交技术,染色体荧光原位杂交,可以确定目标基因的序列和位置,为基因提供重要的参考信息。
检测物种或品种特异性:通过原位杂交技术可以检测出不同物种或品种之间基因表达的差异,从而为物种或品种特异性研究提供依据。
遗传育种:通过原位杂交技术可以检测出不同品种之间基因表达的差异,从而为遗传育种提供重要的参考信息。

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