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为什么不先对基因做预测,在预测的结果上直接做共定位?
不同的预测网站有不同的计算方法,同一个基因在不同的预测网站也可能得出不同的定位结果。另外所有的结果都应是基于实验得到的,对于不清楚可能定位在哪里的基因,一般推荐先做普通定位,根据普通定位的结果再决定做哪种细胞器的共定位。
适用于什么实验场景?
(1)基因功能研究,文章里总少不了这一项。
(2)研究蛋白相互作用,与酵母双杂实验结果相互验证。

亚细胞定位是生物学中一个重要的研究领域,它帮助科学家们理解蛋白质和其它细胞成分如何在细胞内进行定位,这对于理解细胞的生物学和疾病研究都具有重要的意义。植物学研究者也利用亚细胞定位来研究植物细胞的生物学特性。
植物细胞的一个显著特点是它们具有细胞壁。细胞壁是由纤维素等多糖构成的,它包围在细胞膜的外面,提供细胞结构的支持。由于植物细胞壁的存在,植物细胞的亚细胞定位具有一定的性。

构建亚细胞定位载体时,GFP融合位置为什么有N端、C端之分?
若序列中存在信号肽,则构建载体时需避开这一端来融合荧光蛋白。需注意不同的融合方式可能会得到不同的定位结果,例如融合在荧光蛋白N端的目标蛋白一般无法得到过氧化物酶体的定位结果;融合在荧光蛋白C端的目标蛋白一般无法得到线粒体、质体的定位结果。

为什么不同的受体材料有时得到的定位结果不一样?
不同物种的细胞在翻译表达基因时,原位细胞凋亡检测,其表达模式和影响因子不同。受物种差异的影响,同一个载体在不同的受体材料中表达的位置可能不同,因此建议实验时尽可能选用与目的基因来源相近的受体材料进行表达。
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