BIFC-武汉贝科新肽科技公司(图)

亚细胞定位是指确定某种蛋白质或其他生物分子在细胞内的具体位置，比如是在细胞核、细胞质、线粒体、内质网等哪个亚细胞结构中。以下是关于它的详细介绍：

重要性

了解蛋白质功能：蛋白质的功能与其所处的亚细胞位置密切相关。例如，某些蛋白质只有在细胞核内才能发挥转录调控的作用，通过结合到特定的 DNA 序列上，调节基因的表达。

揭示疾病机制：许多疾病的发生往往与蛋白质的亚细胞定位异常有关。比如，在某些神经退行性疾病中，特定蛋白质可能会错误地聚集在细胞的某些区域，导致细胞功能障碍和疾病的发展。

研发：明确蛋白质的亚细胞定位有助于研发。如果知道某种疾病相关蛋白位于特定的亚细胞结构中，就可以设计能够靶向该亚细胞结构的，提高的和特异性。

为什么不先对基因做预测，在预测的结果上直接做共定位？

不同的预测网站有不同的计算方法，同一个基因在不同的预测网站也可能得出不同的定位结果。另外所有的结果都应是基于实验得到的，对于不清楚可能定位在哪里的基因，一般推荐先做普通定位，根据普通定位的结果再决定做哪种细胞器的共定位。

适用于什么实验场景？

（1）基因功能研究，文章里总少不了这一项。

（2）研究蛋白相互作用，与酵母双杂实验结果相互验证。

禾谷菌 CgRab5A 的亚细胞定位研究：刘涵等人利用多片段一步法将 CgRab5A 自身启动子、GFP 片段和 CgRab5A 开放阅读框（ORF）片段到 pKNT 载体上，转化型禾谷菌的原生质体后，通过共聚焦显微镜观察 GFP-CgRab5A 在菌丝和孢子内的定位情况。结果表明，GFP-CgRab5A 在菌丝和孢子细胞内均呈点状分布，BIFC，定位于早期内涵体上。

水稻 OsUF 的亚细胞定位：丁作美等人通过得到水稻 E3 泛素连接酶 — 泛素融合蛋白（OsUF）基因的 cDNA 序列，并利用 Gateway 同源重组体系将 OsUF cDNA 全长重组到融合表达绿色荧光蛋白（GFP）的表达载体上，通过农杆菌介导的烟草瞬时表达系统进行亚细胞定位。结果显示，OsUF 蛋白定位在细胞核。